人乳腺癌阿霉素耐藥細胞
貨號 KL-012/Adr
簡稱 MCF-7/Adr
細胞數 1×106
規格 1ml/T25
價格 詢價
注意事項：
1. 收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細描述 Description
人乳腺癌阿霉素耐藥細胞
細胞特性
1）來源：乳腺癌
2）形態：上皮細胞樣貼壁生長
3）含量：>1x106 個/mL
4）污染：支原體、**、酵母和**檢測為陰性
5）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存：使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T25培養瓶中培養，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途：僅供科研使用。
人乳腺癌阿霉素耐藥細胞
細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
注意：培養瓶里面的培養液是不含**的，待細胞長到70-80%匯合度時，去掉培養液，加含500ng/ml阿霉素**的培養液，放入培養箱，這段時間會有少部分細胞懸浮起來，屬于正常情況，通過換液可以去掉，等細胞長滿就可以消化傳代了，這時可以一直用含**培養基來培養細胞，兩代之后就可以將**濃度提高到1000ng/ml，細胞凍存時不要在培養基中加**。
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091)，90%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，10%，添加2mM L-GLU，添加1uM Adr。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．人乳腺癌阿霉素耐藥細胞細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。**天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）人乳腺癌阿霉素耐藥細胞細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
