人肺粘液上皮樣癌細胞
貨號 KL-003
簡稱 NCI-H292
細胞數 1×106
規格 1ml/T25
價格 詢價
人肺粘液上皮樣癌細胞注意事項：
1. 收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細描述 Description
細胞介紹
此細胞株源自肺粘膜上皮細胞癌的**結轉移灶。這個細胞系用化學合成培養基分離得到，并轉換成含血清培養液培養。此細胞在培養時在亞顯微結構上保留了粘膜上皮細胞的特性，并表現出鱗狀分化的多種標記。
細胞特性
來源：肺
形態：上皮細胞樣，貼壁生長
含量：>1x106 個/mL
污染：支原體、**、酵母和**檢測為陰性
規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞接受后的處理：
收到細胞后，人肺粘液上皮樣癌細胞請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
棄去T25瓶中的培養基，添加6ml本公司附帶的完全培養基。
如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
細胞用途：僅供科研使用。
人肺粘液上皮樣癌細胞
本公司的細胞培養操作規程，供參考
一．培養基及培養凍存條件準備：
準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；上等胎牛血清，10%。
培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
細胞處理：
復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。**天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養液后吹勻。
移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3）細胞凍存：人肺粘液上皮樣癌細胞待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，*后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心，用血清重懸浮，加DMSO至*終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
