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新聞詳情

單克隆抗體選擇性培養(yǎng)

日期:2025-10-22 04:39
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摘要:
      1975年分子生物學(xué)家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上,創(chuàng)建立雜交瘤技術(shù),他們把可在體外培養(yǎng)和大量增殖的小鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)抗原**后的純系小鼠B細(xì)胞融合,成為雜交細(xì)胞系,既具有瘤細(xì)胞易于在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細(xì)胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細(xì)胞培養(yǎng),可形成單細(xì)胞系,即單克隆。利用培養(yǎng)或小鼠腹腔接種的方法,便能得到大量的、高濃度的、非常均一的抗體,其結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,而且在培養(yǎng)過程中,只要沒有變異,不同時間所分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)與機(jī)能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。
      這項新技術(shù)從根本上解決了在抗體制備中長期存在的特異性和可重復(fù)性問題,可用于探討①蛋白質(zhì)的精細(xì)結(jié)構(gòu);②**細(xì)胞亞群的表面新抗原;③組織相容性抗原;④**和**的放射**(或酶**)分析;⑤腫瘤的定位和分類;⑥純化微生物和寄生蟲抗原;⑦****和與**結(jié)合的**-化學(xué)療法 (“導(dǎo)彈”療法,利用單克隆抗體與靶細(xì)胞特異性結(jié)合,將**帶至病灶部位。因此,單克隆抗體可直接用于人類**的診斷、預(yù)防、**以及**機(jī)制的研究,為人類惡性腫瘤的**診斷與****開辟了廣闊前景。
      選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細(xì)胞,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中,未融合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,不能利用補(bǔ)救途徑合成DNA而死亡。 未融合的**細(xì)胞雖具有次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但其本身不能在體外長期存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從脾細(xì)胞獲得了次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,并具有骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖的特性,因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。 

滬公網(wǎng)安備 31011702004399號

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