人前列腺癌細胞
貨號 KL-008
簡稱 PC-3
細胞數 1×106
規格 1ml/T25
價格 詢價
注意事項：
1. 收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細描述 Description
人前列腺癌細胞
細胞介紹
PC-3源于一位62歲白人男性前列腺腺癌患者的骨轉移灶，細胞的酸性磷酸酶活性和5-α-睪丸**還原酶活性都較低。
細胞特性
1）來源：前列腺，骨轉移
2）形態：上皮細胞樣
3）含量：>1x106 個/mL
4）污染：支原體、**、酵母和**檢測為陰性
5）規格：T75瓶或者1mL凍存管包裝
人前列腺癌細胞
運輸和保存：使用T25瓶充液發送活細胞。收到細胞后，請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀態，并將T25瓶置于培養箱約6h或過夜后，再次檢查細胞狀態。若狀態良好，可進行細胞后續處理操作，按照以下方式進行。若發現可疑污染物，請及時與我們取得聯系。
細胞用途：僅供科研使用。
人前列腺癌細胞
細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備F-12K 培養基（F-12K ：GIBCO，貨號：21127-022）90%，上等胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。**天換液并檢查細胞密度。
2）人前列腺癌細胞細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
