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產品詳情
  • 產品名稱:人胚腎細胞

  • 產品型號:293KB
  • 產品廠商:KALANG
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簡單介紹:
人胚腎細胞生長狀態良好的細胞,在一般顯微鏡下觀察時可見,細胞透明度大、折光性強、輪廓不清。細胞生長**時,輪廓增強,胞質中常出現空泡、脂滴和其他顆粒狀物,細胞之間空隙加大,細胞形態可變得不規則甚至失去原有特點,如上皮細胞變成類上皮細胞等,人胚腎細胞活性好、存活率高,無**、**和支原體污染。細胞到達客戶手中,7天內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司可以免費再向客戶提供一次。
詳情介紹:

                               人胚腎細胞

                                293KB     

貨號:KL-036

細胞特性

1)來源:人,胚腎

2)形態:上皮細胞樣,貼壁生長

3)含量:>1x106 個/mL

4)污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性

5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

人胚腎細胞運輸和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T75培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

細胞用途:僅供科研使用。                       

人胚腎細胞培養步驟

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備DMEM-H培養基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;上等胎牛血清,10%。也可根據實驗需要選擇懸浮培養基,使293T細胞懸浮生長。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。**天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

人胚腎細胞對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

人胚腎細胞注意事項:

1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。

 

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