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產品詳情
  • 產品名稱:NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)

  • 產品型號:NCI-H2227
  • 產品廠商:KALANG
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簡單介紹:
NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)是1989年8月從一名54歲白人男性小細胞肺癌皮膚轉移灶中分離得到的。凍存前12~24h,換新鮮培養(yǎng)基,使細胞一直處于對數生長期。細胞凍存后應取出一管復蘇,檢測細胞的存活率。理論上細胞可在液氮內長期保存,NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)為穩(wěn)妥起見可在細胞凍存半年后復蘇培養(yǎng),觀察細胞生長情況,再繼續(xù)凍存。
詳情介紹:

NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)

細胞名稱:NCI-H2227    人小細胞肺癌細胞

培養(yǎng)條件:DMEM:F12+0.005mg/mL 胰島素+0.01mg/mL 轉鐵蛋白+30nM 亞砷酸鈉+10nM 氫化可的松+10nM β-雌二醇+extra 2mM L-谷氨酰胺 (for final conc. of 4.5mM)+5% FBS

形  態(tài):既有懸浮生長,又有貼壁生長

背  景:該細胞是1989年8月從一名54歲白人男性小細胞肺癌皮膚轉移灶中分離得到的。

NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)操作說明:

1)對于常溫運輸的細胞,收到細胞后,檢查是否有運輸問題,即細胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精**后,保留封口膜,放入細胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴格檢查培養(yǎng)箱的參數:溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后,細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細胞培養(yǎng)體系,NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)嚴格按照說明書的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內做細胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。

2)對于干冰運輸的細胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。

NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)注意事項:

1)細胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。

2)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當的提高培養(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度。

3)對于生長不均的貼壁細胞:在培養(yǎng)過程中若出現細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 

NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)下面介紹幾種細胞培養(yǎng)過程中常見的污染:

)桿菌污染:培養(yǎng)基中加入***可以減少此種污染,但也不是**的。

)支原體污染:傳說中的黑焦蟲,長得暴快。24小時就滿視野都是了。污染源大多數情況下是培養(yǎng)用血清。

)***污染:似乎無處不在,而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細胞上,高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。

)霉菌污染、比較常見的一種污染,常常來源于污染的空氣、水和器械。

 

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