菌種儲備用瓊脂培養基

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菌種儲備用瓊脂培養基                  

——用于葉酸、泛酸測定中菌中的儲備

菌種儲備用瓊脂培養基使用方法:

 稱取本品15.0g于1L蒸餾水或去離子水中，加熱煮沸至完全溶解，分裝，121℃高壓**15分鐘,備用。

常用培養基及基本特性

1、RPMI-1640 Medium

RPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養，是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成**細胞、T細胞**瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。

2、Minimum Essential Medium（MEM）

也稱*低必需培養基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養。MEM-Alpha一般用于培養一些難培養細胞類型，而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養。

3、DMEM-高糖（標準型）是一種應用十分廣泛的培養基，菌種儲備用瓊脂培養基可用于許多哺乳動物細胞培養,更適合高密度懸浮細胞培養。適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。

4、DMEM-低糖（標準型）是一種應用十分廣泛的培養基，可用于許多哺乳動物細胞培養。低糖適于依賴性貼壁細胞培養，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。

5、DMEM/F12

DMEM/F12培養基適于克隆密度的培養。F12培養基成分復雜，含有多種微量元素，和DMEM以1：1結合，稱為DMEM/F12培養基（DME/F12medium），作為開發無血清配方的基礎，以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養成分為優點。該培養基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養。菌種儲備用瓊脂培養基為了增強該培養基的緩沖能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES緩沖液。

6、McCoy’s 5A

McCoy’s 5A Medium 主要為肉瘤細胞的培養所設計，可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細胞培養外，主要用于作組織活檢培養、一些**細胞培養以及一些難培養細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人**細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。

7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)

Guilber 和Iscove將Dulbecco’Medium 改良為 Iscove’s Medium，用于培養紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B**細胞，LPS刺激的B細胞，骨髓造血細胞，T細胞和**瘤細胞的生長。IMDM為營養非常豐富的培養液，因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養。

8、M-199 Medium

1950年，Morgan成功研制出具有確定化學成分的細胞培養液，即M-199，主要用于雞胚成纖維細胞培養。菌種儲備用瓊脂培養基此培養液必須輔以血清才能支持長期培養。M-199可用于培養多種種屬來源的細胞，并能培養轉染的細胞。

9、Leibovitz Medium （L-15）

L-15培養液適用于快速增殖瘤細胞的培養，用于在CO2缺乏的情況下培養腫瘤細胞株。此培養液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。

10、Ham’s F-10培養基：適應小鼠細胞、人類二倍體的培養。

11、Ham’s F-12培養基：可以在加入很少血清的情況下應用，特別適合單細胞培養和克隆化培養，是無血清培養中常用的基礎培養液。

12、William’s Medium E：用于大鼠肝上皮細胞的長期細胞培養。

13、MCDB 131 培養液：用于培養內皮細胞。

14、Opti-MEM I Reduced Serum Media：用于培養造血細胞。

15、植物血凝素（PHA）：增加細胞轉化和DNA合成。